一、如何區分不同級別的生物安全柜？

生物安全柜是為操作原代培養物、菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實驗材料時，用來保護操作者本人、實驗室環境以及實驗材料，使其避免暴露于上述操作過程中可能產生的感染性氣溶膠和濺出物而設計的。

生物安全柜可分為Ⅰ級、Ⅱ級、Ⅲ級。

Ⅰ級生物安全柜可保護工作人員和環境而不保護樣品。氣流原理和實驗室通風櫥一樣，不同之處在于排氣口安裝有HEPA過濾器。一級生物安全柜本身無風機。Ⅱ級生物安全柜是目前應用最為廣泛的柜型。 與Ⅰ級生物安全柜一樣，Ⅱ級生物安全柜也有氣流流入前窗開口，被稱作“進氣流”，用來防止在微生物操作時可能生成的氣溶膠從前窗逃逸。與Ⅰ級生物安全柜不同的是，未經過濾的進氣流會在到達工作區域前被進風格柵俘獲，因此試驗品不會受到外界空氣的污染。

Ⅱ級生物安全柜的一個獨te之處在于經過HEPA過濾器過濾的垂直層流氣流從安全柜頂部吹下，被稱作“下沉氣流”。下沉氣流不斷吹過安全柜工作區域，以保護柜中的試驗品不被外界塵埃或細菌污染。因此，所有的Ⅱ級生物安全柜都可提供工作人員、環境和產品的保護。

Ⅲ級生物安全柜是為4級實驗室生物安全等級而設計的，是目前世界上zui高安全防護等級的安全柜。柜體完quan氣密，100%全排放式，所有氣體不參與循環，工作人員通過連接在柜體的手套進行操作，俗稱手套箱(Golve box)，試驗品通過雙門的傳遞箱進出安全柜以確保不受污染，適用于高風險的生物試驗。

二、Ⅱ級生物安全柜的分類及選型有哪些？

Ⅱ級生物安全柜按排放氣流占系統總流量的比例及內部設計結構，將其劃分為A1、A2、B1、B2四個類型。

A1型安全柜前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.4m/s。安全柜內70%氣體通過高效空氣過濾器過濾后再循環至工作區，30%氣體通過排氣口的高效空氣過濾器排出。安全柜內的污染氣流經過高效空氣過濾器過濾后可以排到實驗室或經安全柜的外排接口通過排風管道排到大氣中。

A2型安全柜前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.5m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環至工作區，30%的氣體通過排氣口過濾排除。安全柜內的污染氣流經過高效空氣過濾器過濾后可以排到實驗室或經安全柜的外排接口通過排風管道排到大氣中。安全柜的負壓環繞污染區域的設計，阻止了柜內物質的泄漏。

B1型生物安全柜前窗操作口流入氣流的zui低流速為0.50m/s，柜內氣體中30%氣體通過高效空氣過濾器過濾后再循環使用，70%氣體通過排氣口HEPA過濾器過濾后通過專用風道排入大氣中。所有被生物污染的部位均應保持負壓，或被負壓的通道和負壓通風系統包圍。

B2型生物安全柜前窗操作口流入氣流的zui低流速為0.5m/s，柜內下降氣流全部是由柜外供給，即安全柜排出的氣體不再循環使用。柜內的氣流經過濾后排入大氣，不允許再進入安全柜循環或返流回實驗室，可同時提供生物性和化學性的安全控制。所有污染部位均應處于負壓狀態或者被負壓區包圍。

三、生物安全柜檢測依據什么標準？

生物安全柜檢測現行的主要標準依據有：

（1）歐盟EN 12469：2000《Biotechnology-Peformance Criteria for Microbiological Safety Cabinets》

（2）美國NSF/ANSI 49—2002《Class II(Laminar Flow) Biosafety Cabinetry》；

（3）JG 170-2005中華人民共和國建筑工業行業標準《生物安全柜》；

（4）YY 0569-2011中華人民共和國醫藥行業標準《Ⅱ級生物安全柜》。

鑒于生物安全柜危險的使用環境，在安裝時以及以后每隔一定時間，要由具有CMA檢測資質與能力的第三方檢驗檢測機構按照規定對每一臺生物安全柜的整體運行性能進行性能檢測，以檢查其是否符合國家及國際的性能標準保證使用者的安全。

四、生物安全柜檢測主要檢測哪些指標？

生物安全柜檢測主要包括物理學檢測和生物學檢測兩個方面，根據檢測性質可分為首ci檢測、后續檢測。除生物安全柜的一年一度的常規檢測外，下列情況之一時，如安裝后、移動后、檢修后、更換過濾器后，也必須進行現場生物安全柜檢測。

按照《Ⅱ級生物安全柜》（YY0569-2015）、《生物安全柜》（JG170-2005）和《消毒技術規范》（2002年版）要求，Ⅱ級生物安全柜檢測指標包括高效過濾器檢漏、潔凈度、下降氣流流速、工作窗口進口平均風速、溫升、氣體流向、照度、噪聲、振幅、紫外線燈強度。安裝后、移動后、檢修后、更換過濾器后還必須加測柜檢漏和人員安全性、受度樣本安全性和交叉感染。Ⅲ級生物安全柜還須檢測靜壓差。

五、使用生物安全柜有哪些注意事項？

（1）超凈工作臺≠生物安全柜。超凈工作臺看似和生物安全柜非常相似，但超凈工作臺只保護工作區的樣品免受外部環境污染，并不能保護操作人員。

（2）請勿使用生物安全柜處理有毒、易燃、易爆等材料。

（3）應避免使用明火。因明火產生的熱效應會干擾生物安全柜操作區內的氣流穩定，且火焰熱氣會影響濾器的壽命。如必須使用，可根據需要選取即用即燃式滅菌器具或微型接觸式燃燒器。

（4）請勿在生物安全柜內擺放過多物品，否則會影響安全柜氣流和安全性能。

（5）合理選擇生物安全柜的安裝地點。應當盡量遠離外部氣流干擾因素，例如門窗、空調通風口、人員過道以及其他實驗室氣流干擾設備（安全柜、通風櫥等）。

（6）生物安全柜中一般不需要紫外燈。如果使用紫外燈的話，應該每周進行清潔，以除去可能影響其殺菌效果的灰塵和污垢。

（7）在安全柜使用前后，請按照程序為安全柜進行表面除菌。使用適當的消毒劑，例如70%的異丙醇溶劑擦拭安全柜的工作區表面，包括前后的近期格柵。

（8）注意安全柜自凈周期。開啟關閉安全柜時，讓安全柜自主運行3-5分鐘的自凈周期。這個自凈程序可以清除安全柜的工作區域內可能存在的經空氣傳播的污染物。

（9）確保安全柜在工作時前窗處于正確的額定操作高度。

（10）正確著裝為操作中提供必要保護。當進行高危險性操作，例如生物安全水平2+到3級操作時，應選用長袖、背面開口的隔離衣和兩副手套，并確保外層手套套住隔離衣袖口。不能有暴露在外的肌膚。

（11）在安全區域內進行操作。切勿阻塞工作區前后的通風格柵。盡量在工作區的中心部位進行操作。

（12）遵循清潔區到污染區的操作原則。生物安全柜的工作區應該被依次劃分為三個區域：清潔區、工作區和污染區。生物危害性廢棄物袋應放置在污染區內；實驗儀器和樣品應放置在工作區域；而實驗供給品應放置在潔凈區內。在工作臺面上的實驗操作應該按照從清潔區到污染區的方向進行。

六、如何判斷高效過濾器需要更換?

（1）風速變小。當檢測發現潔凈度指標正常、下降氣流或流入氣流流速變小時；或者設備在運行過程中，若設備發出聲光報警且是因下降氣流或流入氣流流速低造成的(顯示窗口分別所顯示數值低于設計要求)說明過濾器堵塞己十分嚴重，風機轉速己達到最大值，系統無論如何調整都無法達到規定的風速值，此時必須更換過濾器。

（2）壓力傳感器報警。當壓力指示器顯示值大于170Pa時報警系統報警。

（3）檢測高效過濾器完整性發現有泄漏。

（4）氣流模式改變時。通過檢測發現，垂直氣流（下降氣流）出現死角和回流，有煙霧從柜內泄漏出來，或進入柜內的煙霧有外逸時。

（5）控制面板上的風機累計運行時間，如果達到10000小時，通常需要更換過濾器，但不是必須更換，還要考慮使用環境的潔凈程度，使用習慣等。